Folat terdapat luas di dalam bahan makanan terutama dalam bentuk poliglutamat. Folat terutama terdapat di dalam sayuran hijau, hati, daging tanpa lemak, serealia utuh, biji-bijian, kacang-kacangan dan jeruk.
Vitamin C yang ada dalam jeruk menghambat kerusakan folat. Bahan makanan yang tidak banyak mengandung folat adalah susu, telur, umbi-umbian dan buah, kecuali jeruk.
Nilai asam folat berbagai bahan makanan (µg/100 gram)
[table “59” not found /]Sebanyak 75% folat di dalam makanan terdapat dalam bentuk poliglutamat dan sisanya sebagai monoglutamat. Karena folat mudah rusak pada pemanasan, dianjurkan tiap hari makan buah sayur mentah, atau sayur yang dimasak tidak terlalu matang.
Ketersediaan biologik folat berasal dari bahan makanan dibatasi oleh kehadiran inhibitor berupa enzim folat hidrolase dan faktor lain. diperkirakan bahwa hanya 50% folat berasal dari makanan dapat diabsorpsi. Folat ternyata disintesis dalam jumlah banyak oleh bakteri usus.